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雅酶ZJ103 Omni-Rapid™快速蛋白定量试剂盒(您所在地区可能无法购买,详情请咨询:400-0588-030)

市场价:¥698.00

商城售价:¥698.00

所得积分:698

货 号:ZJ103

品 牌:雅酶(EpiZyme)

规格:500次(微孔)

存储条件:常温(部分组分-20℃)

供货时间:现货

数 量:
库存9992件
  • 产品详情


Omni-Rapid快速蛋白定量试剂盒

Omni-RapidProtein Assay Kit

本产品冰袋运输BSA标准品-20℃保存其它组分4℃保存保质期12个月

 

货号规格

ZJ103     500次(微孔)

 

产品内容

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产品特点

简单速 ——室温5min完成显色反应

方便快捷——提供即用型标准品,省去繁琐的稀释步骤

准确高 ——变异系数远小于考马斯亮蓝染色法

线性范围宽——灵敏,检测范围:20~2000μg/mL

兼容好 ——与大多数金属离子、螯合剂及去污剂兼容性较好

 

产品简介

Omni-Rapid™快速蛋白定量试剂盒的原理与传统BCA 蛋白定量法类似,但采用了一种不同于BCA Bicin-choninic Acid)的全新特殊的螯合剂,从而实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原 理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽键能与Cu2+形成络合物,将Cu2+还原成Cu+Cu+与螯合物结合,从而 发生颜色反应。本试剂盒中的螯合剂可敏感特异地与Cu+结合,只需室温孵育5min即可形成稳定的橙黄色 的水溶性复合物,而传统BCA法则需在37下孵育30min才可完成颜色反应。该橙黄色的复合物在480nm 处有强光吸收值,颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒 含有牛血清白蛋白(BSA)溶液作为蛋白质标准品溶液,测定范围为20~2000μg/mL

 

使用说明

以微孔酶标仪法为例

1. 配置显色工作液

a. 计算显色工作液总量

工作液总量 =(BSA标准品样本个数+待测样本个数)×复孔数×每个样本显色工作液体积

举例BSA标准品样本个数为8个待测样本个数3个复孔数3个

显色工作液总量 =(8个BSA标准品样本+3个待测样本)×3个复孔×200μL(每个样本工作液体积)= 6.6mL

b. 根据计算出的显色工作液需要总量将试剂A和试剂B按照50:1的体积比配制显色工作液充分混匀

 注意1)试剂B刚加入试剂A时,会出现灰蓝色沉淀,但只需混匀几秒钟,沉淀就会消失,形成透亮的绿色溶液

         2)建议工作液现用现配,在室温下,工作液会逐渐变为深绿色,但只要在1.5h内使用,对定量的准确性不会造成影                            响

          3)由于加样可能存在误差,建议配制BCA工作液时,多配制1~2个孔

2. 定量检测 

1. 分别取 即用型BSA标准品①~⑧ 各20μL加到96孔板中( BSA标准品 使用前须充分溶解摇匀);321.png

2. 1×PBS 0.9%生理盐水将样品适当稀释(可以多作几个梯度,如2倍、4倍、8倍稀释), 加20μL96孔板的样品孔中

3. 各孔加入200μL显色工作液充分混匀盖上96孔板盖室温孵育5min即可进行检测

由于颜色反应速度较快须保证在20~30min之内完成读值如果必须在30min后才能读值可提前加入50μL 1M HCl终止反应

4. 用酶标仪测定每个样品及BSA标准品的A480注意要减去空白对照(稀释液+工作液)的A480

5. 绘制标准曲线计算样品中的蛋白浓度

数据处理时需要去除明显错误的值待测样品浓度可以从标准曲线中查得, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数如果是计算机绘制的曲线可以从计算机给出的线性方程式计算出待测样品的浓度

 

注意事项

1. 本产品可以采用酶标仪(微孔检测法)或者分光光度计(试管检测法)测定蛋白浓度如使用普通的分光光度计测定需根据比色皿的最小检测体积适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变使用分光光度计测定蛋白浓度时每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少

2. 建议每次测定蛋白样品时都须绘制标准曲线,以获得准确数据

3. BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用1×PBS或0.9%生理盐水进行稀释)

4. 完成室温孵育5min后须在20~30min内完成检测否则会影响蛋白定量的准确度

5. 如待测样品中含较多的干扰物质(具体见附表)可采用其它蛋白定量产品

6. 为了您的安全和健康请穿实验服并戴一次性手套操作;

7. 本产品仅限科研使用。 

干扰物质附表

 

化合物

耐受浓度

化合物

耐受浓度

盐/缓冲液

去垢剂

ACES, pH 7.8

25 mM

Brij-35

5.0%

Bicine, pH 8.4

20 mM

Brij-58

1.0%

Borate

50 mM

Na Deoxycholate(DOC)

5.0%

Calcium chloride in TBS, pH 7.2

10 mM

Octyl β-glucoside

5.0%

Na-Carbonate/Na-Bicarbonate, pH 9.4

0.1 M

Span-20

0.5%

Cesium bicarbonate

100 mM

TritonX-100

5.0%

CHES, pH 9.0

100 mM

Triton-X-114, riton-X-305,Triton-X-405

1.0%

Na-Citrate

75 mM

Tween-20, Tween-60, Tween-80

5.0%

MOPS, pH 7.2

100 mM

Zwittergent 3-14

1.0%

Cobalt chloride in TBS, pH 7.2

0.8 mM

螯合剂

EPPS, pH 8.0

100 mM

EDTA

10 mM

Ferric chloride in TBS, pH 7.2

10 mM

Sodium citrate

200 mM

Glycine•HCl, pH 2.8

100 mM

还原剂

Guanidine•HCl

4 M

N-acetylglucosamine in PBS, pH 7.2

10 mM

HEPES, pH 7.5

100 mM

糖类

Imidazole, pH 7.0

12.5 mM

Glucose

10 mM

MES, pH 6.1

100 mM

其它

MES (0.1M), NaCl (0.9%), pH 4.7

未稀释

Acetone

10%

Nickel chloride in TBS, pH 7.2

10 mM

Acetonitrile

10%

PBS; Phosphate (0.1 M), NaCl (0.15 M), pH 7.2

未稀释

Aprotinin

10 mg/L

DMF, DMSO

10%

PIPES, pH 6.8

100 mM

DMSO

10%

RIPA lysis buffer: 50 mM Tris, 150 mM NaCl, 0.5%

DOC, 1% NP-40, 0.1% SDS, pH 8.0

未稀释

Ethanol

10%

Glycerol (fresh)

10%

Hydrochloric acid

100 mM

Sodium acetate, pH 4.8

200 mM

Leupeptin

10 mg/L

Sodium azide

0.2%

N/A

Sodium bicarbonate

100 mM

Sodium chloride

1 M

Sodium citrate, pH 4.8 or pH 6.4

200 mM

Sodium phosphate

100 mM

Tricine, pH 8.0

25 mM

Triethanolamine, pH 7.8

25 mM

Tris

250 mM

TBS: Tris (25 mM), NaCl (0.15 M), pH 7.6

未稀释

Tris (25 mM), Glycine (192 mM), pH 8.0

1:2稀释


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